Síntese de Oligonucleotídeos

Padrões de qualidade de oligos customizados.

GENONE

A síntese de DNA tem sido nosso principal produto por mais de 10 anos.

Todos os oligos customizados são fabricados de acordo com os padrões de qualidade internacional. Esses padrões de qualidade refletem bons produtos confiáveis e seguros como resultado de processos de produção e fabricação rigorosos.

Síntese de Oligonucleotídeos

Visão global

Qualidade

Um sistema de controle de qualidade rigoroso garante que você pode esperar oligonucleotídeos do mais alto padrão. 

A síntese  de nossos oligos é garantida por rigoroso controle de qualidade. Todos os oligos são rotineiramente analisados ​​por medição de densidade óptica (OD). Além disso, os oligos são analisados ​​por eletroforese em gel e espectrometria de massa por cromatografia líquida (LCMS). Se os oligos não atenderem aos nossos requisitos, eles serão ressintetizados. O resultado de nosso rigoroso processo de controle de qualidade é um produto do mais alto padrão.

Todos os oligos são fornecidos com nossa folha de especificações do produto, que inclui:

Química

*Purificação adicional por HPLC, PAGE ou cartucho (OPC) está disponível para aplicações mais sensíveis.

Ciclo de síntese de oligo

A síntese de oligonucleotídeos é realizada por uma adição em etapas de resíduos de nucleotídeos ao terminal 5 ‘da cadeia em crescimento até que a sequência desejada seja montada.

Cada adição é chamada de ciclo sintético (figura 1) e consiste em quatro reações químicas:

No final da síntese, o oligo é liberado do suporte sólido e é eluído da coluna ou poço.

Como suporte sólido, usamos esferas de poliestireno (PB).

Escala, rendimento e método

A GenOne oferece cinco escalas de síntese diferentes para oligos de DNA. Para cada escala de síntese existe uma restrição quanto ao comprimento do oligo.

*Para escalas maiores entre em contato:  vendas@genone.com.br

Oligo padrão de rendimento garantido

Para oligos de DNA padrão não rotulados e não purificados por HPLC / PAGE de até 30 bases, garantimos um rendimento mínimo. No entanto, em muitos casos, você receberá mais do que o mínimo garantido!

Método

Formato e concentração

Armazenamento e estabilidade
Documentação

Todos os seus oligos de DNA são entregues com uma folha de especificações, incluindo:

Modificações

Entre em contato conosco (vendas@genone.com.br).

Purificações

Todos os oligos de DNA são sintetizados em condições de baixo teor de sal. Isso evita a necessidade de purificação para a maioria das aplicações básicas de biologia molecular. Uma purificação adicional está disponível para aplicações mais sensíveis.

Além disso, recomendamos a purificação de oligos com mais de 35 bases. 

Oferecemos três formas diferentes de purificação:

Purificação de oligo.

Você pode escolher entre três opções para purificar seu oligo: purificação por HPLC, purificação PAGE e purificação por cartucho de fase reversa.

Apesar da eficiência de acoplamento altamente eficiente alcançada pelo GenOne (um rendimento típico da etapa de síntese de 99,5%), cerca de 0,5% de toda a extensão falha. Isso leva a produtos de síntese truncados, sendo o mais longo deles (n-1) mer.

A proporção relativa de material indesejado aumenta à medida que o comprimento do oligo aumenta. Para algumas aplicações, será desejável enriquecer o produto final em oligonucleotídeos de comprimento total.

O tipo de purificação escolhido depende muito de suas demandas em relação à pureza e ao rendimento do produto final. Você deve considerar que a purificação resulta em menor rendimento do produto final. A purificação por PAGE, embora resulte em uma pureza mais alta, geralmente dá rendimentos mais baixos do que a purificação por HPLC.

O tipo de purificação escolhido depende também do comprimento de um oligo. Para oligos com comprimento superior a 50 bases, recomendamos a purificação PAGE para garantir a pureza do produto final.

Purificação com cartucho de fase reversa oferece o nível mais baixo de pureza (normalmente 80%). A base da separação é a diferença na hidrofobicidade entre o produto de comprimento total (que contém um 5′-DMT) e as sequências truncadas (sem grupos DMT).

Como as diferenças na hidrofobicidade entre o produto DMT de comprimento total e as sequências truncadas não DMT são reduzidas à medida que o comprimento do oligo é aumentado, a purificação do cartucho não é recomendada para oligos> 50 bases.

HPLC de fase reversa opera no mesmo princípio que os cartuchos de fase reversa, mas normalmente produz um produto de 90% de pureza. A capacidade e as propriedades de resolução das colunas HPLC também são muito maiores do que os dispositivos de cartucho.

Portanto, HPLC é o método de escolha para purificar grandes quantidades de oligos (ou seja,> = 1 μmol). Tal como acontece com os cartuchos, a HPLC de fase reversa geralmente não é recomendada para purificar oligos com mais de 50 bases.

Com a excelente resolução de PAGE, uma pureza de 95-99% pode ser alcançada. A base da separação é a carga e o peso molecular. Na maioria dos casos, um oligo de comprimento total (n) pode ser separado de oligos apenas uma base mais curta (n-1).

PAGE é a técnica recomendada para purificar oligos com mais de 50 bases de comprimento. Os rendimentos de PAGE são inferiores aos de outros métodos devido à relativa extração ineficiente de oligos do gel.

Oligos longos

 Este protocolo permite a síntese de oligo longo de alta qualidade a um preço acessível. Usando o protocolo B-puro, podemos alcançar uma eficiência de acoplamento> 99,5%.

O controle de qualidade adicional é realizado em nosso sistema LC-MS de última geração para garantir a mais alta qualidade e funcionalidade otimizada dos oligonucleotídeos.

Um sistema de controle de qualidade rigoroso garante que você pode esperar oligonucleotídeos do mais alto padrão. 

A síntese  de nossos oligos é garantida por rigoroso controle de qualidade. Todos os oligos são rotineiramente analisados ​​por medição de densidade óptica (OD). Além disso, os oligos são analisados ​​por eletroforese em gel e espectrometria de massa por cromatografia líquida (LCMS). Se os oligos não atenderem aos nossos requisitos, eles serão ressintetizados. O resultado de nosso rigoroso processo de controle de qualidade é um produto do mais alto padrão.

Todos os oligos são fornecidos com nossa folha de especificações do produto, que inclui:

*Purificação adicional por HPLC, PAGE ou cartucho (OPC) está disponível para aplicações mais sensíveis.

A síntese de oligonucleotídeos é realizada por uma adição em etapas de resíduos de nucleotídeos ao terminal 5 ‘da cadeia em crescimento até que a sequência desejada seja montada.

Cada adição é chamada de ciclo sintético (figura 1) e consiste em quatro reações químicas:

No final da síntese, o oligo é liberado do suporte sólido e é eluído da coluna ou poço.

Como suporte sólido, usamos esferas de poliestireno (PB).

A GenOne oferece cinco escalas de síntese diferentes para oligos de DNA. Para cada escala de síntese existe uma restrição quanto ao comprimento do oligo.

*Para escalas maiores entre em contato:  vendas@genone.com.br

Oligo padrão de rendimento garantido

Para oligos de DNA padrão não rotulados e não purificados por HPLC / PAGE de até 30 bases, garantimos um rendimento mínimo. No entanto, em muitos casos, você receberá mais do que o mínimo garantido!

Método

Formato e concentração

Todos os seus oligos de DNA são entregues com uma folha de especificações, incluindo:

Entre em contato conosco (vendas@genone.com.br).

Todos os oligos de DNA são sintetizados em condições de baixo teor de sal. Isso evita a necessidade de purificação para a maioria das aplicações básicas de biologia molecular. Uma purificação adicional está disponível para aplicações mais sensíveis.

Além disso, recomendamos a purificação de oligos com mais de 35 bases. 

Oferecemos três formas diferentes de purificação:

Purificação de oligo.

Você pode escolher entre três opções para purificar seu oligo: purificação por HPLC, purificação PAGE e purificação por cartucho de fase reversa.

Apesar da eficiência de acoplamento altamente eficiente alcançada pelo GenOne (um rendimento típico da etapa de síntese de 99,5%), cerca de 0,5% de toda a extensão falha. Isso leva a produtos de síntese truncados, sendo o mais longo deles (n-1) mer.

A proporção relativa de material indesejado aumenta à medida que o comprimento do oligo aumenta. Para algumas aplicações, será desejável enriquecer o produto final em oligonucleotídeos de comprimento total.

O tipo de purificação escolhido depende muito de suas demandas em relação à pureza e ao rendimento do produto final. Você deve considerar que a purificação resulta em menor rendimento do produto final. A purificação por PAGE, embora resulte em uma pureza mais alta, geralmente dá rendimentos mais baixos do que a purificação por HPLC.

O tipo de purificação escolhido depende também do comprimento de um oligo. Para oligos com comprimento superior a 50 bases, recomendamos a purificação PAGE para garantir a pureza do produto final.

Purificação com cartucho de fase reversa oferece o nível mais baixo de pureza (normalmente 80%). A base da separação é a diferença na hidrofobicidade entre o produto de comprimento total (que contém um 5′-DMT) e as sequências truncadas (sem grupos DMT).

Como as diferenças na hidrofobicidade entre o produto DMT de comprimento total e as sequências truncadas não DMT são reduzidas à medida que o comprimento do oligo é aumentado, a purificação do cartucho não é recomendada para oligos> 50 bases.

HPLC de fase reversa opera no mesmo princípio que os cartuchos de fase reversa, mas normalmente produz um produto de 90% de pureza. A capacidade e as propriedades de resolução das colunas HPLC também são muito maiores do que os dispositivos de cartucho.

Portanto, HPLC é o método de escolha para purificar grandes quantidades de oligos (ou seja,> = 1 μmol). Tal como acontece com os cartuchos, a HPLC de fase reversa geralmente não é recomendada para purificar oligos com mais de 50 bases.

Com a excelente resolução de PAGE, uma pureza de 95-99% pode ser alcançada. A base da separação é a carga e o peso molecular. Na maioria dos casos, um oligo de comprimento total (n) pode ser separado de oligos apenas uma base mais curta (n-1).

PAGE é a técnica recomendada para purificar oligos com mais de 50 bases de comprimento. Os rendimentos de PAGE são inferiores aos de outros métodos devido à relativa extração ineficiente de oligos do gel.

 Este protocolo permite a síntese de oligo longo de alta qualidade a um preço acessível. Usando o protocolo B-puro, podemos alcançar uma eficiência de acoplamento> 99,5%.

O controle de qualidade adicional é realizado em nosso sistema LC-MS de última geração para garantir a mais alta qualidade e funcionalidade otimizada dos oligonucleotídeos.

BIOTECNOLOGIA

Informações sobre pedidos

E-mail

Baixe nosso formulário de pedido em formato Excel e envie preenchido para: vendas@genone.com.br

Agenda de entrega
Envio e manipulação

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Cada adição é chamada de ciclo sintético (figura 1) e consiste em quatro reações químicas:

No final da síntese, o oligo é liberado do suporte sólido e é eluído da coluna ou poço.

Como suporte sólido, usamos esferas de poliestireno (PB).

Serviço pré-pago (Carta de crédito) Oligo

Com o nosso serviço oligo pré-pago, tornamos os pedidos de oligo fáceis. 

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